NK培養基是為哺乳生物來源的NK細胞培養而設計的，培養基包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質、血清替代物以及其他補給成分。產品嚴格無菌，無病毒和支原體，性能穩定的核心是采用無血清替代物為細胞提供一個營養全面和平衡的環境，不僅包括NK細胞生長的一切養分，還包括促進DC細胞吸附、活化、增殖的添加物，產品適用于人及哺乳類動物NK細胞的培養、活化及增殖。
NK培養基產品特點：
1、培養性能*，支持高密度NK細胞培養；
2、可以培養純度比較低的細胞樣品，培養獲得高純度的NK細胞（CD56+/CD3-）；
3、如果培養時添加病人自體血漿，效果更為顯著；
4、經過微生物檢測（細菌、真菌、霉菌及支原體）、pH檢測、滲透壓和內毒素檢測；
5、不含任何動物源的蛋白成分。
NK培養基培養操作步驟
1、培養皿的包被：按一個10-cm培養皿的表面積計算，將2mlAdvCell細胞墊(BCP0001)與20lAdvCellNK細胞附物(BNKA001)混合后加入培養皿中，4℃下包被過夜。
2、按常規免疫細胞培養的一般準則，如需在生物反應器或培養袋中高密度培養，應優化條件來確定操作步驟。使用前將BNSFM0001中的5種組分按如下體積比在37℃下解凍之后混合混合成*培養基:500mlAdvCell免疫細胞基本培養基（BICBM0001）、20mlAdvCell免疫細胞添加物A（BICS0001A）、1mlAdvCell免疫細胞添加物B（BICS0001B）、1mlAdvCellNK細胞添加物A(BNKS001A)、1mlAdvCellNK細胞添加物B(BNKS001B)。
3、抽取患者外周血50ml，將采集的血樣轉入50ml離心管，2000rpm離心10min。離心結束后，用移液器吸取上層淡黃色血清于新的50ml離心管，蓋好離心管蓋于40℃水浴鍋中孵育30min。孵育結束后，再1400rpm(340g)離心10min,吸取上清于新的離心管保存4℃備用。
4、用移液管將下層的血細胞與生理鹽水1:1混勻，按1：1將懸液緩慢加入裝有淋巴細胞分離液的離心管（注意：不要打亂液面分界保持液面分層明顯）。將離心機的升速與降速調至低，400g離心30min；離心結束后，用5ml移液管吸取中間白膜層于新的50ml離心管，并用生理鹽水洗滌離心兩次，以去除多余血細胞。
5、根據計數結果調整細胞濃度，充分混勻后按1-2×106/ml密度接種于含免疫細胞基本培養基（BICBM0001）的培養瓶中，并按10-cm培養皿的表面積添加20lAdvCellNK細胞添加物B（BNKS001B）。當細胞生長到第三天離心換液（340g離心10min）更換新鮮培養基及AdvCellNK細胞添加物B。
6、以后4-6天每天鏡檢觀察，根據細胞懸液顏色添加培養液，每次添加應為總體積的三分之一左右。第七天計數，當細胞量大于6×107時，則添加AdvCellNK細胞添加物B；如細胞數量在3-6×107時，則長至第八天添加AdvCellNK細胞添加物B，加液時使總細胞濃度保持在1-1.5×106cell/ml。
7、當培養液體積大于150ml或細胞數量大于1.5×108時則需轉移至培養袋培養（氣泡盡量排空，以免影響細胞生長）。第8-11天每天鏡檢觀察計數，根據細胞懸液顏色加培養液。第12-14天觀察需加液時，細胞濃度需保持在2×106cell/ml。當細胞達到所需劑量時，即可離心收集細胞待用。
以上就是NK培養基的產品特點和七個培養步驟介紹，給大家參考，并希望有所幫助！
服務熱線： 
